原裝進口elisa試劑盒的一些使用問題解析

更新時間：2022-08-24

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　　原裝進口elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠游離脂肪酸（FFA）水平。用純化的小鼠游離脂肪酸（FFA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入游離脂肪酸（FFA），再與HRP標(biāo)記的游離脂肪酸（FFA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成醉終的黃色。顏色的深淺和樣品中的游離脂肪酸（FFA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠游離脂肪酸（FFA）濃度。

　　原裝進口elisa試劑盒的問題解析：

　　1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。

　　2、加樣中可能遇到的問題：在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時，然后在進行離心處理

　　3、洗板時容易造成誤差：因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動

　　4、顯色問題：使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應(yīng)的時候，要先查看顯色劑本身的情況

　　5、終止反應(yīng)：在加終止劑的時候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒

　　6、讀板：讀板的時候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈

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