上海仁捷生物科技有限公司
人生長分化因子15(Growth Differentiation Factor 15,GDF15)是一種重要的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白,在多種病理生理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。本文詳細(xì)介紹了上海仁捷生物科技有限公司自主研發(fā)的GDF15 ELISA試劑盒的技術(shù)原理、性能參數(shù)、操作流程及典型應(yīng)用案例,為研究人員提供全面的技術(shù)參考。
GDF15屬于TGF-β超家族成員,又稱MIC-1(macrophage inhibitory cytokine-1),具有以下重要功能:
調(diào)控能量代謝平衡
參與炎癥反應(yīng)
影響腫瘤發(fā)生發(fā)展
與心血管疾病密切相關(guān)
高靈敏度:檢測下限達(dá)10 pg/mL
寬檢測范圍:50-1600 pg/mL
優(yōu)異特異性:不與TGF-β家族其他成員交叉反應(yīng)
穩(wěn)定可靠:批內(nèi)變異系數(shù)<8%,批間變異系數(shù)<10%
多種樣本適用:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等
本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心法:
包被:高親和力抗GDF15單抗預(yù)包被于微孔板
結(jié)合:樣本中GDF15與包被抗體特異性結(jié)合
檢測:加入生物素標(biāo)記的二抗
信號放大:鏈霉親和素-HRP復(fù)合物結(jié)合
顯色:TMB底物顯色反應(yīng)
抗體配對:經(jīng)過嚴(yán)格篩選的高效抗體對
信號放大:生物素-親和素放大系統(tǒng)
干擾控制:特殊緩沖體系降低基質(zhì)效應(yīng)
樣本類型 | 處理方法 | 注意事項 |
---|---|---|
血清 | 室溫凝固30min后,2000×g離心15min | 避免溶血 |
血漿 | EDTA抗凝,離心去除血小板 | 及時分離 |
細(xì)胞上清 | 0.22μm濾膜過濾 | 避免反復(fù)凍融 |
試劑準(zhǔn)備(室溫平衡30min)
加樣(標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各100μL)
37℃孵育90min
洗板(自動洗板機推薦)
加檢測抗體(100μL/孔)
37℃孵育60min
洗板
加酶結(jié)合物(100μL/孔)
37℃孵育30min
洗板
顯色(TMB,15min)
終止反應(yīng)
450nm讀數(shù)
四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線
質(zhì)控要求:R2≥0.99
推薦使用專業(yè)ELISA分析軟件
案例:急性心肌梗死患者血清GDF15動態(tài)監(jiān)測
方法:收集50例AMI患者發(fā)病后0、6、12、24、48h血清樣本
結(jié)果:GDF15水平在發(fā)病6h顯著升高,與心肌損傷程度正相關(guān)(r=0.72)
案例:結(jié)直腸癌患者預(yù)后評估
方法:檢測120例患者術(shù)前血清GDF15水平
結(jié)果:高GDF15組(>200pg/mL)5年生存率顯著低于低水平組(38% vs 72%)
案例:2型糖尿病肥胖患者干預(yù)研究
方法:檢測生活方式干預(yù)前后GDF15變化
結(jié)果:有效減重組GDF15下降幅度顯著(P<0.01)
問題現(xiàn)象 | 可能原因 | 解決方案 |
---|---|---|
標(biāo)準(zhǔn)曲線不佳 | 標(biāo)準(zhǔn)品溶解不充分 | 充分震蕩混勻 |
背景值高 | 洗板不充分 | 增加洗滌次數(shù) |
重復(fù)性差 | 操作不一致 | 統(tǒng)一操作手法 |
注意樣本采集時間(晝夜節(jié)律影響)
考慮藥物干擾(如二甲雙胍可升高GDF15)
結(jié)合臨床其他指標(biāo)綜合分析
免費技術(shù)咨詢:專業(yè)團(tuán)隊提供實驗設(shè)計指導(dǎo)
方法學(xué)驗證服務(wù):協(xié)助完成方法學(xué)比對
定制化服務(wù):可根據(jù)需求調(diào)整檢測范圍
關(guān)鍵詞:GDF15、ELISA試劑盒、上海仁捷生物、心血管標(biāo)志物、腫瘤標(biāo)志物、代謝調(diào)控
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